熒光定量檢測的檢測周期是多久？

 

一、按檢測場景分類

 

1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）

 

應(yīng)用場景：基因定量（如病毒載量、基因表達(dá)分析）、病原體檢測（如新冠病毒）等。

 

周期：

 

樣本制備：30分鐘～2小時(shí)（核酸提取、純化）。

 

上機(jī)檢測：40分鐘～1.5小時(shí)（儀器運(yùn)行，完成40~50個(gè)循環(huán)）。

 

總周期：通常2~4小時(shí)（含前處理），自動化程度高的設(shè)備可縮短至1.5小時(shí)左右。

 

2.熒光免疫定量檢測

 

應(yīng)用場景：蛋白質(zhì)定量（如腫瘤標(biāo)志物、激素）、藥物濃度監(jiān)測等。

 

周期：

 

免疫反應(yīng)：30分鐘～2小時(shí)（抗原-抗體孵育，取決于反應(yīng)溫度和試劑盒設(shè)計(jì)）。

 

熒光檢測：5~10分鐘（上機(jī)讀取熒光信號）。

 

總周期：1~3小時(shí)（手工操作流程較長，全自動設(shè)備可縮短至1小時(shí)內(nèi)）。

 

3.細(xì)胞熒光定量分析（如流式細(xì)胞術(shù)）

 

應(yīng)用場景：細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞表面標(biāo)志物定量、細(xì)胞周期分析等。

 

周期：

 

樣本染色：30分鐘～1小時(shí)（熒光標(biāo)記抗體孵育）。

 

上機(jī)檢測：5~30分鐘（取決于細(xì)胞濃度和檢測參數(shù)數(shù)量）。

 

數(shù)據(jù)分析：10分鐘～1小時(shí)（復(fù)雜分析需更久）。

 

總周期：1~3小時(shí)。

 

4.小分子熒光定量（如熒光探針法）

 

應(yīng)用場景：環(huán)境污染物（如重金屬、農(nóng)藥殘留）、食品添加劑檢測等。

 

周期：

 

樣本前處理：1~4小時(shí)（萃取、純化等，視基質(zhì)復(fù)雜度而定）。

 

熒光檢測：5~15分鐘（直接測量或反應(yīng)后測量）。

 

總周期：2~5小時(shí)（復(fù)雜樣本如土壤、血液需更長前處理時(shí)間）。

 

二、影響檢測周期的關(guān)鍵因素

 

樣本前處理復(fù)雜度

 

簡單樣本（如血清、細(xì)胞裂解液）：前處理時(shí)間短（30分鐘～1小時(shí)）。

 

復(fù)雜樣本（如組織、糞便、環(huán)境樣本）：需均質(zhì)化、去雜質(zhì)、濃縮等步驟，可能耗時(shí)2小時(shí)以上。

 

檢測儀器自動化程度

 

全自動設(shè)備：如集成樣本制備-檢測的熒光定量PCR儀，總周期可壓縮至1.5小時(shí)內(nèi)。

 

手動/半自動化設(shè)備：需人工操作加樣、孵育等步驟，周期延長至2~4小時(shí)。

 

熒光反應(yīng)動力學(xué)

 

快速反應(yīng)體系（如實(shí)時(shí)PCR）：檢測階段僅需數(shù)十分鐘。

 

慢反應(yīng)體系（如某些免疫熒光）：需長時(shí)間孵育（如過夜），總周期可能超過12小時(shí)（但此類場景較少，多通過優(yōu)化試劑縮短時(shí)間）。

 

多指標(biāo)同時(shí)檢測

 

單指標(biāo)檢測：周期較短（如單重qPCR）。

 

多重檢測（如同時(shí)測10種病原體）：儀器運(yùn)行時(shí)間增加，但前處理可同步進(jìn)行，總周期延長約20%~50%。

 

總結(jié)

 

熒光定量檢測的周期最短可控制在1小時(shí)內(nèi)（如簡單樣本的快速免疫檢測），復(fù)雜場景則需數(shù)小時(shí)。實(shí)際周期需結(jié)合具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、樣本特性及設(shè)備性能綜合判斷，建議通過預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化流程或咨詢儀器廠商獲取針對性方案。